Habitualmente el citoplasma de las células del epitelio vaginal se tiñen de azul, pero en la superficie del epitelio vaginal esta coloración se torna a naranja por la presencia de queratohialina intracelular. Este precursor de la queratina aparece como consecuencia del incremento de los estrógenos en sangre periférica, promoviéndose la proliferación, maduración y queratinización del epitelio vaginal. Por lo expuesto, con este método ultrarrápido de tinción tricrómica podremos evaluar la transición de color (azul a rosa) en el citoplasma de las células exfoliadas del epitelio vaginal.
Tabla 1. Protocolo de la tinción Papanicolaou ultrarrápido (CC Pérez et al., 2005: Use of ultrafast Papanicolaou stain for exfoliative vaginal cytology in bitches. Veterinary Records 156, 648-50)
Paso |
Tratamiento |
Cantidad/duración |
1 |
Solución salina |
30 segundos |
2 |
Etanol al 95% |
Al menos una inmersión |
3 |
Formalina alcohólica* |
10 segundos |
4 |
Agua |
6 inmersiones lentas |
5 |
Solución de Hematoxilina de Harris |
45 segundos |
6 |
Agua |
6 inmersiones lentas |
7 |
Etanol al 95% |
6 inmersiones lentas |
8 |
Solución Orange G |
60 segundos |
9 |
Etanol al 95% |
6 inmersiones lentas |
10 |
Solución policromática EA50 |
60 segundos |
11 |
Etanol al 95% |
6 inmersiones lentas |
12 |
Etanol al 100% |
6 inmersiones lentas |
13 |
Etanol al 100% |
6 inmersiones lentas |
14 |
Xileno+ |
Inmersión |
Montado |
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Tiempo total |
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5 minutos |
* 4% de Formaldehído en 65% de Etanol
+ Xileno ayuda a completar la deshidratación celular y aporta limpieza al aspecto celular. Puede ser omitido cuando no se monte la preparación |